基于TaqMan实时荧光聚合酶链式反应和DNA条形码技术鉴别松茸及其伪品

Identification of Tricholoma matsutake and its counterfeits based on TaqMan real-time fluorescence polymerase chain reaction technology and DNA barcoding technology

二维码有效期 120s

摘要目的建立松茸(Tricholoma matsutake)成分的 TaqMan 实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)定性检测方法,并结合DNA条形码技术鉴定松茸及其制品成分与其标签的符合性.方法以松茸的pol基因为靶基因,设计特异性引物及探针,对其特异性、灵敏度、重复性开展研究分析,并将建立的松茸成分TaqMan实时荧光PCR检测方法对不同种类市售松茸样品开展检测,鉴别其真实性.结果采用建立的TaqMan实时荧光PCR方法进行检测,松茸与其他32种食用菌和动植物样品均无交叉反应,方法特异性强;灵敏度为质量分数 0.01%的松茸和 0.01 ng/μL松茸基因组DNA;对市售 160份松茸及其制品开展真实性检测,研究表明松茸干品存在假冒现象,检测结果与标签不符合率为 36.70%,采用 DNA 条形码技术进一步对假冒松茸的物种进行鉴定,物种属性为皱环球盖菇(Stropharia rugosoannulata)、巨大口蘑(Tricholoma giganteum)和栎松口蘑(Tricholoma bakamatsutake),其他收集的松茸制品成分检测结果中与标签不符合率分别为23.70%～60.00%.结论该方法灵敏度高,特异性强,可快速精准地对松茸成分进行真实性和符合性鉴别.