全自动免疫磁珠纯化法与免疫亲和柱法对食品中黄曲霉毒素B1检测结果的影响比对
Effection and comparison of detection results of aflatoxin B1 in foods by fully automated immunomagnetic bead purification method and immunoaffinity column method
摘要目的 采用全自动免疫磁珠纯化法与免疫亲和柱法对大米、小麦制品、花生制品等多种基质进行前处理,检测其黄曲霉毒素 B1(aflatoxin,AFB1)含量,并比较两种前处理方法的检测结果.方法 样品经甲醇:水(70:30,V:V)提取后,一部分提取液采用免疫亲和柱法经AFB1专用免疫亲和柱净化,另取一部分提取液采用搭配免疫磁珠试剂盒的全自动免疫磁珠纯化仪进行前处理,最后都采用高效液相色谱法-柱后衍生法进行检测.结果 免疫磁珠纯化试剂盒效能和免疫亲和柱柱效均大于 95%,皆能满足实验要求.在质量浓度为1.00~50.00 ng/mL的线性范围内,线性相关系数(r)为 0.99993,线性关系良好.在大米基质中进行 3 水平加标回收率实验(n=6),两种前处理方法回收率范围为 98.2%~106.0%,相对标准偏差为 1.0%~5.0%;在小麦制品中进行单水平加标回收率实验(n=6),回收率超过 80%,相对标准偏差为 3.7%~7.2%.AFB1 阳性花生制品、玉米粉基质质控样品采用两种前处理方法进行检测,并对结果进行t检验,显示所得结果无显著性差异;对玉米粉基质质控样品采用两种前处理方法进行检测后所得结果进行Bland-Altman统计分析,结果表明在检测该基质AFB1 时两种方法可以相互替代.免疫亲和柱法净化步骤耗时长,20 批样品耗时约 3~4 h;只能人工操作,产生大约 1000 mL废液;而免疫磁珠法采用全自动磁珠纯化仪,净化步骤一次 40 min,可自动完成 20 批样品,几乎无废液产生.结论 全自动免疫磁珠纯化法与免疫亲和柱法检测多种基质中的AFB1 均能取得良好效果,且免疫磁珠纯化法效率高、处理简便、产生废液少,成本可降低大约 50%.
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