基于量子检测技术的呕吐毒素高灵敏检测系统的构建及应用
Construction and application of high sensitivity detection system for deoxynivalenol based on quantum detection technology
摘要目的 基于量子点微球(quantum dot nanobeads,QBs)的荧光信号放大特性,结合竞争式荧光免疫层析技术,构建适用于粮油作物中呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)的快速定量检测系统.方法 采用巯基丙酸定向偶联技术制备出呕吐毒素-牛血清白蛋白偶联物(deoxynivalenol-bovine serum albumin conjugate,DON-BSA),通过杂交瘤细胞技术筛选高效DON单克隆抗体,并利用间接酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)对其性能表征.基于此开发新型竞争式荧光免疫层析系统,结合便携式荧光读数仪实现目标物定量分析.结果 获得高亲和力DON单克隆抗体,所构建检测系统在最优参数下检出限达10ng/mL,精确定量线性范围为80~1600 ng/mL(r2=0.9961).实际样品加标回收率为80.0%~114.0%(变异系数≤11.0%,n=6),符合GB 5009.111-2016《食品安全国家标准食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定(含第1号修改单)》和GB/T 27417-2017《合格评定化学分析方法确认和验证指南》方法学要求.测定3-乙酰基-脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰基-脱氧雪腐镰刀菌烯醇等结构类似毒素时未出现交叉反应.结论 本研究构建的量子点荧光检测系统具有快速简便、灵敏度高、特异性强等特点,检测性能符合国家食品安全标准,可为粮油作物生产流通环节的现场筛查及为基层监管提供有效的技术支撑.
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