高效液相色谱-串联质谱法测定甲壳类水产品中过敏原原肌球蛋白
Determination of allergen tropomyosin in crustacean aquatic products by high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry
摘要目的 建立高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)检测甲壳类水产品中主要过敏原原肌球蛋白(tropomyosin,TM)的分析方法.方法 以南美白对虾(Litopenaeus vannamei)TM为研究对象,通过生物信息学分析筛选特异性标志肽段,优化质谱参数构建基于合成肽段及重组TM标准物质的定量模型,通过方法学验证及实际样品检测评估方法性能.结果 筛选出 6条用于定性的特异性标志肽段,其中IVELEEELR作为定量肽段;该方法的检出限和定量限分别为67 μg/kg与301μg/kg,线性关系良好,空白基质(鱼糜制品、鳕鱼肠、原味肉松)加标回收率为84.63%~109.33%[相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)≤8.93%],阳性基质(亲亲虾条、豚骨拉面调料)回收率为99.35%~107.50%(RSD≤6.71%),实际检测15种市售食品的检出正确率为100%.结论 本研究建立的HPLC-MS/MS多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式检测方法,基于特征肽段实现了甲壳类TM的特异性检测,具有灵敏度高、抗干扰能力强、适用性广等优势,可为食品加工过程中过敏原污染及GB 7718-2025《食品安全国家标准预包装食品标签通则》中过敏原强制标签标准的实施提供可靠的技术支持.
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