换一批重组酶聚合酶扩增探针辅助荧光与胶体金试纸条双模式快速鉴定GⅡ型诺如病毒单碱基突变
Dual-mode rapid identification of GⅡ norovirus single nucleotide polymorphism by recombinase polymerase amplification probe-assisted fluorescence and lateral flow strip
摘要目的 建立基于重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)探针辅助荧光与胶体金试纸条双模式快速检测GⅡ型诺如病毒单碱基突变(single nucleotide polymorphism,SNP)的方法.方法 本研究应用扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutation system,ARMS)技术与RPA技术结合胶体金试纸条检测GⅡ型诺如病毒的单个碱基突变.选定编码GⅡ型诺如病毒RdRp和VP1蛋白的一段基因区域,主动设计单个碱基的突变,以此作为靶基因,设计并合成高特异性引物,扩增产物上样后通过试纸条控制线(C线)、检测线(T线)显色强度判读结果.优化胶体金与抗体偶联体系后进行了特异性、灵敏度、重复性和稳定性实验,并检测了食品加标样本.同时用荧光法作为辅助手段来验证试纸条结果的可靠性.结果 本方法可在43℃下反应25 min识别单个碱基的突变,检出限为102 copies/μL,可检测低至1％的突变,与荧光法检测结果一致.结论 本研究建立的基于ARMS-RPA结合胶体金试纸条的GⅡ型诺如病毒突变检测方法,不仅能够实现单碱基突变的可视化检测,而且操作简便、检测速度快、灵敏度高,还可在现场即时检测,具有良好的应用前景.
更多相关知识
关键词
GⅡ型诺如病毒单碱基突变胶体金试纸条荧光法扩增阻滞突变系统重组酶聚合酶扩增可视化检测GⅡ norovirussingle nucleotide polymorphismlateral flow stripfluorescence verificationamplification refractory mutation systemrecombinase polymerase amplificationvisual detection
栏目名称
DOI
10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.20250902004
发布时间
2025-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
- 浏览2
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
