换一批手持式实时荧光定量聚合酶链式反应仪现场快速检测肉类样本猪、鸡、鸭源性成分
Rapid detection of pork,chicken and duck-derived components in meat samples by handheld quantitative real-time polymerase chain reaction
摘要目的 建立适用于手持式实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)仪肉类成分检测方法,实现肉源性成分现场快速检测.方法 本研究以猪、鸡、鸭源性成分为研究对象,探索肉类样本前处理工具、裂解液成分、裂解液浓度、裂解液添加量等对所提DNA的影响,构建肉类样本快速预处理方法;筛选特异性引物和探针,利用手持式实时荧光定量 PCR一体机进行特异性、灵敏度、检出限验证,绘制扩增标准曲线;对真实单一肉类样品和混合样品进行检测.结果 建立的肉类样本快速预处理方法 5 min完成操作,提取DNA耗时 10 min,提取的DNA满足后续实验;猪、鸡、鸭检测体系均具有良好的特异性;对猪、鸡、鸭源性 DNA 成分的检出限分别为 0.010、0.001、0.001 ng/μL;所建立的标准曲线线性关系良好,猪肉 DNA扩增标准曲线:Y=-3.956X+38.803,r2=0.9956;鸡肉DNA扩增标准曲线:Y=-3.499X+40.491,r2=0.9909;鸭肉DNA扩增标准曲线:Y=-3.961X+39.192,r2=0.9962;对 28 份肉类样本检测,成功率为 100%.结论 本研究建立的方法可用于在手持式实时荧光定量PCR一体机上对猪、鸡、鸭肉类样本的快速、准确检测,为肉类食品的市场监管和相关执法提供有力的技术保障.
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关键词
快速预处理手持式实时荧光定量聚合酶链式反应猪、鸡、鸭源性成分快速检测食品真实性现场检测rapid pretreatmenthandheld quantitative real-time polymerase chain reactionpork,chicken and duck-derived componentsrapid detectionfood authenticityon-site detection
栏目名称
DOI
10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.20250915002
发布时间
2026-01-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点研发计划（2021YFC2401005）
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