换一批实时荧光定量聚合酶链反应技术检测食品中动物源性成分单拷贝核基因靶标
Determination of single-copy nuclear gene targets of animal-derived components in food by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction technology
摘要目的 建立针对食品中动物源性成分单拷贝核基因靶标的实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测方法.方法 以食品中常见动物源性成分特异性核基因为靶标设计 qPCR 引物及 Taqman 探针,验证及确认方法的特异性、灵敏度,采用模拟及实际市售动物源性食品检测方法的适用性及稳定性,并同胞质线粒体基因靶标 qPCR 扩增检测值比较分析.结果 单拷贝核基因靶标的qPCR引物探针特异性良好,其最低检出限可达0.1 ng/μL DNA质量浓度,核基因靶标能够准确识别 0.10%(质量比)的最低掺假成分含量;核基因靶标扩增反应的扩增循环数(cycle threshold,Ct)值大于胞质靶基因 Ct 值,胞质靶基因可识别更低 0.01%(质量比)的掺假含量;在对模拟及实际市售样品检测中,核基因qPCR 反应可以准确、有效检测出掺有不同源性成分的动物源样品,且不易检出鸡精配料及生产线其他源性污染成分.结论 本研究结果表明基于单拷贝核基因靶标建立的 qPCR 扩增体系对食品中常见动物源性成分检测的特异性强,灵敏度高,同胞质靶基因扩增结果相比,其检测结果不易受配料代入和加工过程中交叉污染的影响,可快速准确检测动物源性成分掺假情况,利于市场监管及风险研判.
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关键词
动物源性食品实时荧光定量聚合酶链反应法核基因animal-derived foodreal-time fluorescence quantitative polymerase chain reactionnuclear gene
DOI
10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.20250906001
发布时间
2026-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
湖北省食品质量安全监督检验研究院自主立项项目（ZZLX2025003）
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