桔梗多糖的复合酶提取、结构表征及抗氧化活性分析
Compound Enzyme Extraction of Platycodon grandiflorum Polysaccharides and Its Structure and Antioxidant Activity Characterization
摘要目的:优化复合酶法提取桔梗多糖工艺,并初步分析桔梗多糖的结构和体外抗氧化活性.方法:分别考察酶添加量、料液比、酶解时间、酶解温度对桔梗多糖提取率的影响,采用响应面法进行提取条件优化,利用高效液相色谱法(HPLC)测定多糖的分子量和单糖组成,应用核磁共振(NMR)和扫描电镜(SEM)对多糖的糖苷键和形貌进行分析,并对多糖清除自由基的能力和还原力进行研究.结果:桔梗多糖的最佳提取工艺为纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶的添加量为 2%,酶解时间 90 min,料液比 1∶30 g/mL,酶解温度 50℃,在此条件下,多糖实际提取率为9.01%±0.07%,多糖含量达92%±0.76%.纯化后得到桔梗多糖组分PGP-W-1,分子量为6.2 kDa,由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖按照摩尔比 4.9∶4.3∶7.9∶7.8∶4.8∶18.6组成,是一种具有α型糖苷键和β型糖苷键的吡喃型多糖.体外抗氧化试验显示PGP-W-1对DPPH自由基、ABTS+自由基和羟基自由基清除率IC50 值分别为 2.14、2.25、0.78 mg/mL.结论:本研究优选出的桔梗多糖提取工艺切实可行,多糖提取效率高并表现出良好的体外抗氧化活性.
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