换一批噬夏孢欧文氏菌crtY基因在大肠杆菌中的表达及其产物的纯化
Expression of crtY from Erwinia uredovora in Escherichia coli and Purification of Its Gene Product
摘要噬夏孢欧文氏菌(Erwinia uredovora)可以累积类胡萝卜素,合成过程涉及的一系列反应都是在相关酶的催化下完成的,其中番茄红素环化酶由基因crtY编码,催化由番茄红素转化为β-胡萝卜素的酶促反应.本研究以噬夏孢欧文氏菌基因组DNA为模板,通过聚合酶链式反应扩增获得crtY基因,测序正确后克隆进表达载体pET-15b,构建表达质粒pET-15b-crtY,重组质粒转化E.coli BL21(DE3),构建工程菌,经IPTG诱导后,重组番茄红素环化酶在大肠杆菌中实现了高效表达,通过镍离子树脂亲和层析和Superdex 75凝胶过滤层析,得到了电泳纯的重组噬夏孢欧文氏菌番茄红素环化酶,该蛋白体外具有催化番茄红素转化为β-胡萝卜素的活性.
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分类号
Q562（维生素）
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1002-6630.2007.05.047
发布时间
2007-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
山东省青岛市自然科学基金（2003;05-1-JC-91）
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