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大肠杆菌O157∶H7荧光微球免疫层析试纸条的研制

Development of Fluorescent Microsphere Immunochromatographic Strip for Detection of Escherichia coli O157∶H7

摘要目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157∶H7荧光微球免疫层析试纸条法.方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157∶H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157∶H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双抗体夹心反应模式制备大肠杆菌O157∶H7荧光微球免疫层析试纸条.结果:通过优化实验确定偶联缓冲液为0.02mol/L pH5.0磷酸盐缓冲液,抗体偶联微球量为100μg/mg,试纸条可在加样5min后判读结果.制备的荧光微球试纸条对纯培养大肠杆菌O157∶H7进行检测,肉眼观察检测限在1.2×104CFU/mL,借助荧光读取仪检测限能提高到6.1×103CFU/mL.试纸条除与金黄色葡萄球菌有微弱交叉反应外,与实验室保存的30株细菌无交叉反应.结论:大肠杆菌O157∶H7荧光微球试纸条具有操作简便、快速灵敏、易于量化的特点,为该菌的检测提供了一种新型的手段.

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作者 解泉源 [1] 赖卫华 [1] 刘春梅 [2] 孙吉昌 [3] 邓省亮 [4] 刘成伟 [3] 魏华 [1] 游兴勇 [3] 熊勇华 [1] 学术成果认领
分类号 TS207.3
栏目名称
DOI 10.7506/spkx1002-6630-201316072
发布时间 2014-07-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
科技部科技支撑计划项目(2011BAK10B06-01)
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