换一批TaqMan探针双重荧光PCR法检测副溶血性弧菌
Detection of Vibrio parahaemolyticus Using Duplex Fluorescence Real-Time PCR with TaqMan Probe
摘要目的:建立同时检测副溶血性弧菌(VP)和其毒力基因的方法.方法:根据VP的toxR基因和tdh基因,分别设计引物和探针,建立基于TaqMan探针双重荧光聚合酶链式反应扩增体系,进行特异性、敏感性实验,并用建立的方法检测从广东地区和辽宁地区进出口食品中分离的VP菌株的毒力基因分布情况.结果:VP标准菌株和3株从食物中毒病人中分离株均出现toxR基因和tdh基因扩增曲线,而31株包括溶藻弧菌、单增李斯特菌等弧菌属和肠杆菌科的菌株扩增结果呈阴性;敏感性实验结果表明,VP浓度与Ct值有很好的反向的线性关系,toxR和tdh线性方程的R2分别为0.999、0.997,最低检测浓度达到3.6×102CFU/mL;检测食品中分离的37株VP只出现toxR基因扩增曲线,未见tdh基因扩增曲线,表明37株VP分离株均未带tdh毒力基因.结论:建立的方法特异性好、灵敏度高,可用于食品中VP的特异性及毒力基因检测.
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关键词
副溶血性弧菌toxR基因tdh基因TaqMan探针双重荧光聚合酶链式反应检测食品Vibrio parahaemolyticustoxR genetdh geneTaqMan based probeduplex fluorescence real-time PCRdetection
分类号
Q939.93（应用微生物学）
栏目名称
DOI
10.7506/spkx1002-6630-201318054
发布时间
2014-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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