换一批大豆锰超氧化物歧化酶基因在乳酸乳球菌中的分泌表达
Cloning and Expression of Manganese Superoxide Dismutase Gene by Food-Grade Vector in Lactococcus lactis
摘要为使大豆锰超氧化物歧化酶(Mn superoxide dismutase,MnSOD)在乳酸乳球菌中高效表达,将克隆的MnSOD基因开放阅读框序列分别重组到质粒pNZ8149和经改造的质粒pNZS上,表达载体pNZ-SOD和分泌表达载体pNZS-SOD,将两者分别以电穿孔法转化乳酸乳球菌L.lactis NZ3900,经Elliker琼脂板筛选、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、酶切鉴定正确后,获得的两重组菌株加入Nisin进行诱导表达,对L.lactis NZ3900/pNZ-SOD和L.lactis NZ3900/pNZS-SOD的表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和酶活性对比分析.结果显示:L.lactis NZ3900/pNZS-SOD菌株表达SOD总活性约是L.lactis NZ3900/pNZ-SOD菌株的1.6倍,是L.lactis NZ3900/pNZ8149的13.5倍,且可将表达的约2/3的SOD分泌到胞外,表明经改造的乳酸菌分泌表达系统L.lactis NZ3900/pNZS能够分泌表达SOD,并增强SOD的表达.
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关键词
锰超氧化物歧化酶(MnSOD)食品级分泌表达载体乳酸乳球菌manganese superoxide dismutase (MnSOD)food-grade vectorLactococcus lactis
栏目名称
DOI
10.7506/spkx1002-6630-201501026
发布时间
2015-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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