换一批Pseudomonas sp.W7产低温蛋白酶培养基及培养条件的优化
Optimization of Medium Components and Culture Conditions for Cold-Adapted Protease Produced by Pseudomonas sp.W7
摘要采用Plackett-Burman法对影响假单胞菌(Pseudomonas sp.)W7产低温蛋白酶的因素进行显著性分析,筛选出对产酶影响显著的3个因素:葡萄糖、蛋白胨和MgSO4;然后用最陡爬坡试验逼近最大产酶区域;应用Box-Behnken原理设计和响应面分析确定产酶培养基的最佳组合为:葡萄糖4.25 g/L、蛋白胨7.00 g/L、干酪素4.00 g/L、K2HPO4 5.00 g/L、KH2PO4 1.00 g/L、CaCl2 0.26 g/L、MgSO4 0.14 g/L,低温蛋白酶的酶活力达到了183.9 U/mL,比优化前提高了21％.另外,对Pseudomonas sp.W7的产酶条件进行了优化,在单因素的基础上,利用正交试验设计,最终确定产酶的最优培养条件为:培养温度为20℃、初始pH值为7.0、接种量为3％、装液量为20％、摇床转速为100 r/min,在最佳条件时测得的酶活力为193.2 U/mL.通过生长曲线和产酶曲线的测定,确定产酶的培养时间为48h.
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关键词
低温蛋白酶假单胞菌W7培养条件优化响应面分析cold-adapted proteasePseudomonas sp.W7optimization of fermentation conditionsresponse surface analysis
分类号
Q814.9（酶工程）
栏目名称
DOI
10.7506/spkx1002-6630-201519029
发布时间
2015-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
黑龙江省自然科学基金（C201035）
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