换一批乳粉中阪崎肠杆菌污染检测试剂盒的研制
Development of a Test Kit for Rapid Detection of Enterobacter sakazakii Contamination in Milk Powder
摘要目的:以乳粉中污染的阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)为检测目标,开发一种能快速检测其污染的试剂盒.方法:以两株阪崎肠杆菌单克隆抗体分别为包被抗体和检测抗体,建立双抗体夹心酶联免疫吸附实验方法,优化各个反应条件,制成在2h内能发生显色反应的检测试剂盒.结果:包被抗体的最佳工作质量浓度为10 μg/mL,检测抗体的最佳稀释倍数为1:5 000.试剂盒的检测限为104 CFU/mL,在104～108CFU/mL范围内OD450nm值与阪崎肠杆菌浓度的常用对数值呈线性关系.特异性实验中,试剂盒可检出3株阪崎肠杆菌标准菌株,对其他9株食品中常见致病菌的检测均呈阴性.模拟带菌实验中,初始菌浓度为1 CFU/mL的模拟样品经过8h前增菌后,通过该试剂盒便可检出.该试剂盒的批内、批间变异系数均小于6％,至少可在室温保存6个月.结论:该双抗体夹心试剂盒具有灵敏度高、特异性好、精密度高、稳定性强等优点,可应用于乳粉中阪崎肠杆菌的快速检测.
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关键词
双抗体夹心法酶联免疫吸附试剂盒灵敏快速检测致病菌double-antibody sandwichELISA kitsensitiverapid assaypathogenic bacteria
分类号
TS201.3
栏目名称
DOI
10.7506/spkx1002-6630-201624037
发布时间
2017-02-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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