换一批N-糖基化修饰对极端嗜热酸性α-淀粉酶ApkA酶学性质的影响
Effect of N-Glycosylation on Enzymatic Characteristics of Hyperthermoacidophilic a-Amylase ApkA
摘要为探索N-糖基化修饰对极端嗜热酸性α-淀粉酶ApkA酶学性质的影响,同时为构建酵母工程菌奠定基础,将ApkA缺失信号肽突变体ApkAds及含有2个潜在Ⅳ-糖基化修饰位点的突变体ApkAdsD182N/G373S在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中进行表达.ApkAds和ApkAdsD 182N/G373S在Pichia pastoris GS115中大量表达并分泌到胞外,ApkAds的表观分子质量约为45 kD,ApkAdsD182N/G373S的表观分子质量约为55 kD.酶学性质分析表明,-ApkAds相比,ApkAdsD 182N/G373S的酶学性质发生了一定的变化.其最适反应pH值由6.5降低至5.5～6.0,酸性条件下稳定性增强;最适反应温度由90℃提高至100℃;于90℃的半衰期由5h增加至5.5h,于100℃保温10 min后的相对酶活力由32.03％增加至49.04％.结果表明N-糖基化修饰可适当提高ApkA的酸性条件下酶活力和稳定性、最适反应温度、热稳定性.突变体ApkAdsD182N/G373S的酶学性质使其适于淀粉液化工艺的应用.
更多相关知识
关键词
极端嗜热酸性α-淀粉酶毕赤酵母GS115N-糖基化修饰分泌表达hyperthermoacidophilic a-amylasePichia pastoris GS115N-glycosylationsecretion expression
分类号
Q814
栏目名称
DOI
10.7506/spkx1002-6630-201706008
发布时间
2017-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
- 浏览5
- 被引2
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
