换一批双齿围沙蚕多肽的制备及其抗肺癌A549细胞活性
Anticancer Activity of a Novel Peptide Derived from Hydrolysates of Perinereies aibuhitensis against Lung Cancer A549 Cells
摘要探讨双齿围沙蚕酶解多肽制备的关键技术及其对肺癌A549细胞的作用.以增殖抑制率为指标,确定最佳酶种并根据单因素试验和正交试验确定其最佳酶解工艺.经超滤获得1～3ku的酶解液,通过阴离子色谱、凝胶过滤色谱和制备色谱对其进行进一步的分离纯化.采用四甲基偶氮唑蓝法测定沙蚕多肽PAP对肺癌A549细胞的增殖抑制率并通过倒置显微镜、吖啶橙/溴化乙锭荧光染色及Hoechst荧光染色观察其细胞形态的变化.实验结果表明最佳酶种是碱性蛋白酶,其最佳酶解条件为:酶解温度50℃、pH 11、料液比1∶1(g/mL)、酶解时间6h、加酶量300U/g.经纯化获得的多肽命名为PAP,其氨基酸序列为Ile-Glu-Pro-Gly-Thr-Val-Gly-Met-Met-Phe,且PAP对A549细胞的作用呈时间与剂量依赖关系,作用后细胞出现了凋亡的形态学特征.因此,PAP能明显抑制肺癌细胞A549增殖,可以诱导其发生凋亡而发挥抗肿瘤作用.
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分类号
R734.2（呼吸系肿瘤）
栏目名称
DOI
10.7506/spkx1002-6630-201712005
发布时间
2017-08-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81001393）
国家级星火计划（2015GA700044）
国家海洋重大计划项目（2015862）
浙江省科技厅重大专项（2013C03036）
浙江省自然科学基金（LS15H30001）
浙江省自然科学基金（LQ16H300001）
舟山市科技计划（2015C31012）
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