换一批纳豆激酶基因工程菌的构建及酶活力分析
Construction of Genetically Engineered Strain for Nattokinase Production and Enzyme Activity Analysis
摘要纳豆激酶由纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)的apr基因编码,在体内外具有很强的溶解纤维蛋白活性.利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增B.subtilis natto的aprN基因,并依据B.subtilis的密码子偏好性优化了起始30个氨基酸的密码子,构建了重组表达质粒pHT0 1-aprN.经限制性酶酶切、PCR扩增和测序验证了其编码的正确性.通过电击法将含有强启动子的pHT01-aprN导入B.subtilis,利用氯霉素抗性筛选获得B.s 168/pHT01-apr工程菌.经IPTG诱导表达,摇瓶发酵培养最高酶活力为(289.00±3.42) U/mL,是野生菌的3.9倍,酶活力表达稳定性良好.
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DOI
10.7506/spkx1002-6630-201714001
发布时间
2017-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31171737）
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