苯基乳酸耐受性大肠杆菌的筛选及其高产苯基乳酸特性
Screening of Phenyllactic Acid-Resistant Escherichia coli and Its Application in the Synthesis of Phenyllactic Acid
摘要苯基乳酸(phenyllactic acid,PLA)耐受性菌株的筛选能够有效降低PLA对生产菌株的抑制作用,有利于PLA产量的提高.通过紫外诱变的方法筛选耐受PLA的菌株,并应用于PLA的合成.以Escherichia coli BL21(DE3)作为原始出发菌株,通过紫外诱变的方法诱变筛选获得一株耐受PLA突变菌株E coli Z2016(CCTCC保藏编号M2016332).以E coli Z2016为宿主菌,分别构建了重组菌株Ecoli Z2016 pET-28a-ldhY52V和E coli Z2016 pET-28a-ldhL用于D-和L.苯基乳酸的合成.结果表明:E.coli Z2016在含有1 g/L D-PLA的培养基中能够正常生长;重组突变菌株E coli Z2016 pET-28a-ldhY52V和E coli Z2016 pET-28a-ldhL全细胞合成D-PLA和L-PLA产量分别为6.75、6.97g/(L·h),较重组出发菌株分别提高了14.02%和8.95%;分批补加底物反应120 min,E coli Z2016 pET-28a-ldhY52V得到的D-PLA为20.02 g/L,较对照组提高22.17%,转化率为90.07%;Ecoli Z2016 pET-28a-ldhL得到的L-PLA产量为20.87 g/L,较对照组提高16.85%,最终转化率为91.24%.筛选耐受性菌株是提高PLA产量的有效途径.
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