换一批以猪小肠黏膜提取物作为α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶Ⅳ的酶活力分析体系的建立
Establishment of Activity Assays for α-Glucosidase and Dipeptidyl Peptidase Ⅳ Using Porcine Small Intestine Mucosal Extracts
摘要α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶Ⅳ (dipeptidyl peptidase 4,DPP-4)是Ⅱ型糖尿病治疗中2种重要的靶向酶.这两种商品化酶价格昂贵且主要来源于微生物,难以有效用于两种酶抑制剂的筛选,而这两种酶均普遍存在哺乳动物的小肠中.为了获得经济有效、来源于哺乳动物体内的α-葡萄糖苷酶和DPP-4,本研究收集新鲜的猪小肠黏膜分泌物及上皮细胞,对比分析了猪小肠不同部位黏膜提取物的α-葡萄糖苷酶和DPP-4的活力.以猪小肠黏膜提取物作为α-葡萄糖苷酶和DPP-4的酶反应体系,并且利用这两种酶的阳性药(阿卡波糖和抑二肽素A(diprotin A,IPI))分别进行了抑制率验证和评价.阿卡波糖对商品和猪回肠源α-葡萄糖苷酶的半数有效抑制质量浓度(median inhibition concentration,IC50)分别是1.102 4、0.244 7 mg/mL;IPI对商品和猪回肠源DPP-4的IC50分别为19.1197、41.268 4 μg/mL.通过比较发现,猪回肠黏膜提取物的α-葡萄糖苷酶和DPP-4比活力分别为0.084 1、0.053 4 U/mg,在3种黏膜提取物中均为最高,因此选择猪回肠黏膜提取物作为商品化α-葡萄糖苷酶和DPP-4的替代物进行抑制剂的筛选.
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分类号
TS201.2
栏目名称
DOI
10.7506/spkx1002-6630-20180615-294
发布时间
2020-08-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项（S2016JC01）
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