换一批灵芝酸A多克隆抗体制备及酶联免疫吸附测定法的建立
Preparation of Polyclonal Antibody against Ganoderic Acid A and Establishment of Enzyme Linked Immunosorbent Assay
摘要以牛血清白蛋白为载体,采用活化酯法合成灵芝酸A的偶联抗原作为免疫原,按照免疫程序接种试验兔,获得针对偶联抗原的多克隆抗体.对多克隆抗体的效价及靶向进行分析后,构建灵芝酸A的间接竞争酶联免疫吸附测定法.结果显示:多克隆抗体中存在靶向偶联抗原3个区域的独特型抗体,总效价为1∶78 125,其中抗灵芝酸A特异性抗体效价为1∶3 125.间接竞争酶联免疫吸附测定法的灵芝酸A检出限为0.3 μg/L,半数抑制浓度为4.0 ng/L,线性范围在0.6～27.3 μg/L之间.样品测定批间变异系数低于10％,样品加标回收率在82.9％～118.6％之间,对22份灵芝粉剂产品的测定结果显示不同品牌产品中灵芝酸A含量的差异极显著,该法测定结果与高效液相色谱法的测定结果相比,相关系数为0.972.结果表明,间接竞争酶联免疫吸附法测定灵芝酸A可行,该方法能够为灵芝保健品市场中相关产品的质量监控提供一种辅助方案.
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