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婴儿配方乳粉中食源性致病菌双重ERA快速检测方法的建立

Establishment of a Dual Enzymatic Recombinase Amplification Method for Rapid Detection of Foodborne Pathogens in Infant Formula Powder

二维码有效期 120s

摘要为快速多重筛查婴儿配方乳粉中食源性致病菌的污染情况,建立克罗诺杆菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌及金黄色葡萄球菌双重酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)快速检测方法.首先,通过筛选确定对4种食源性致病菌特异性好、扩增效率高的引物探针.经过优化建立两组双重ERA检测体系可快速筛查4种食源性致病菌.该方法对沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌及金黄色葡萄球菌的检出限均为10-2 ng/μL:对克罗诺杆菌的检出限为1ng/μL.模拟污染实验显示,污染量为1 CFU/mL的样品增菌培养6 h后,可检出4种致病菌.应用该方法对市售婴儿配方乳粉样品进行检测,检测结果与行业标准规定的实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法一致,证实了本研究建立的双重ERA检测方法的准确性和可靠性.采用本方法仅需20 min左右即可一次性检出4种致病菌,相较于传统的"金标准"方法以及实时荧光PCR法显著提高了检测效率,对于推进食源性致病菌的快速筛查具有重要意义.

作者林志伟 ^[1] 王帅 ^[2] 王迎春 ^[3] 吴占文 ^[2] 李涛 ^[3] 李红娜 ^[3] 杨艳歌 ^[3] 袁飞 ^[3] 学术成果认领

作者单位黑龙江八一农垦大学农学院,黑龙江大庆 163000 ^[1] 中国检验检疫科学研究院,国家市场监管重点实验室(食品质量与安全),北京 100176;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆 163000 ^[2] 中国检验检疫科学研究院,国家市场监管重点实验室(食品质量与安全),北京 100176 ^[3]

关键词酶促等温扩增技术克罗诺杆菌沙门氏菌单核细胞增生李斯特菌金黄色葡萄球菌 enzymatic recombinase amplification Cronobacter Salmonella Listeria monocytogenes Staphylococcus aureus

分类号 TS207.4

栏目名称

安全检测

DOI 10.7506/spkx1002-6630-20221013-127

发布时间 2023-10-26

基金项目

国家重点研发计划（2022YFF0607900）；国家重点研发计划（2018YFC1603606）