换一批基于杂交链式反应扩增检测奶粉中阪崎肠杆菌的适配体磁珠荧光传感器
Aptamer-Functionalized Magnetic Bead-Based Fluorescence Sensor for the Detection of Cronobacter sakazakii in Milk Powder Using Hybridization Chain Reaction Amplification
摘要构建一种基于杂交链式反应(hybridization chain reaction,HCR)扩增的适配体磁珠荧光传感器.巧妙设计序列HP和发卡序列H1、H2,其中HP是由适配体序列与触发序列结合而成的,并且序列互补形成稳定的二级结构.然后采用戊二醇反应和亲和素-生物素反应进行适配体功能化磁珠的制备.将阪崎肠杆菌与适配体磁珠一起孵育,HP中的适配体序列识别靶标,引起HP构象变化,露出触发序列,通过HCR触发H1和H2的链状组装,产生长双链DNA.荧光指示剂SYBR Green I以插层和小槽结合的方式与HCR产物的长双链结合.最后加入氧化石墨烯(graphene oxide,GO)后,游离的H1、H2和SYBR Green I将通过π-π堆积紧密吸附在GO表面,荧光信号被猝灭.HCR产物不能被吸附在GO表面,因此与HCR产物结合的SYBR Green I发出依赖于靶浓度的强荧光信号,从而实现阪崎肠杆菌的定量检测.本方法在纯培养条件下的检出限为2 CFU/mL,对奶粉的检出限为8 CFU/g,对奶粉样品的检测结果与传统微生物培养法具有良好的一致性.该方法具有无需DNA提取,快速、稳定性高、高特异性和高灵敏度等优点,因此为阪崎肠杆菌的现场快速检测提供了一种很有潜力的方法.
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关键词
阪崎肠杆菌适配体功能化磁珠杂交链式反应扩增磁珠荧光传感器氧化石墨烯Cronobacter sakazakiiaptamer-functionalized magnetic beadshybridization chain reaction amplificationmagnetic bead-based fluorescence sensorgraphene oxide
分类号
TS207.4
栏目名称
DOI
10.7506/spkx1002-6630-20230310-100
发布时间
2024-03-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31871875）
河北省重点研发计划项目（21372801D）
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