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基于TiO2/KCC-1固相萃取的亲水作用超高效液相色谱-串联质谱法测定南极磷虾磷脂

Determination of Phospholipids in Antarctic Krill by Hydrophilic Interaction Ultra-high Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry Using TiO2/KCC-1 Solid Phase Extraction

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摘要以自制钛基树枝状纤维形SiO2(TiO2/KCC-1)纳米材料作为固相萃取(solid phase extraction,SPE)填料对南极磷虾中的磷脂进行纯化,采用亲水色谱柱结合超高效液相色谱串联质谱法进行磷脂组学分析.选取南极磷虾中最主要的4类磷脂(磷脂酰胆碱(phosphatidylcholines,PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl ethanolamine,PE)、磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)、磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol,PI))作为研究对象.结果显示,在最优条件下共检测到291种磷脂,比已报道的方法多近1倍.在这些磷脂中,含有单不饱和脂肪酸链的磷脂占总磷脂含量的54.73％,含有多不饱和脂肪酸链的磷脂占总磷脂含量的26.17％.南极磷虾中共检出PC 75种、PE120 种、PI54 种、PS42 种.其中PC(40∶6)(41.63％)、PE(36∶0)(39.77％)、PI(38∶3)(80.05％)、PS(36∶1)(81.62％)在4类磷脂中的含量最高.多元统计分析结果显示,SPE处理前后磷脂种类有明显差异,TiO2/KCC-l材料对磷脂的富集效果显著,特别是对PC(18∶0/18∶0)、PE(16∶0/18∶1)、PI(16∶0/18∶2)等富集作用明显.PC、PE和PS的检出限均为0.05 μg/g,PI的检出限为0.01 μg/g,4种磷脂的相对标准偏差在0.89％～5.05％之间,回收率在87％～112％之间.该方法专一性强、提取效率高、灵敏度和精密度高、准确度好,在生物样本中磷脂的提取、纯化及其检测方面具有广阔的应用前景.