柱前衍生结合高效液相色谱荧光检测法快速测定奶粉中1-脱氧野尻霉素
Rapid Determination of 1-Deoxynojirimycin in Milk Powder by Precolumn Derivatization Combined with High Performance Liquid Chromatography with Fluorescence Detection
摘要建立功能性奶粉中1-脱氧野尻霉素含量柱前衍生结合高效液相色谱荧光快速检测方法.奶粉经60%甲醇水溶液提取,在pH 8.5的硼酸盐缓冲液条件下,加入邻苯二甲醛衍生剂,去除伯胺类物质的干扰后,样品中的1-脱氧野尻霉素与9-芴甲氧羰酰氯反应生成具有荧光吸收的络合物.采用C18液相色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.7 μm),流动相A为10 mmol/L乙酸钠缓冲溶液,流动相B为乙腈,梯度洗脱,流速1.5 mL/min,柱温45℃,激发波长275 nm,发射波长320 nm.结果表明:1-脱氧野尻霉素与其他组分分离效果良好,方法检出限为4 ng/mL,在0.01~50 μg/mL范围内线性关系良好,决定系数R2>0.999,回收率为101.8%~104.1%.方法验证结果表明该方法稳定可靠,可作为测定奶粉中DNJ含量的有效方法.
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