换一批β-伴大豆球蛋白的提取纯化及多克隆抗体制备
Extraction and Purification of β-Conglycinin and Preparation of Polyclonal Antibodies
摘要本研究通过碱溶酸沉法、切向流过滤(tangential flow filtration,TFF)系统对β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin,β-CG)进行分离纯化,并制备兔抗β-CG多克隆抗体,通过间接酶联免疫吸附和免疫印迹检测抗体效价及其特异性.采用棋盘滴定法明确最佳抗原包被浓度和抗体稀释度.结果显示,经TFF纯化后,β-CG(α'、α和β亚基)占比96.70%,酸性亚基占比3.30%,2S白蛋白和抑制蛋白被去除.自制兔抗β-CG多克隆抗体可有效结合纯化后的β-CG,抗体特异性良好.最终确定的最佳抗原包被质量浓度为1 μg/mL,最佳抗体稀释度为1∶9 000(V/V).综上,本研究不仅可为β-CG的提取与纯化提供新的思路,同时也可为今后研究低致敏性β-CG的作用机制、开发低致敏性大豆蛋白产品奠定基础.
更多相关知识
关键词
β-伴大豆球蛋白提取纯化多克隆抗体酶联免疫吸附试验β-conglycininextraction and purificationpolyclonal antibodiesenzyme-linked immunosorbent assay
分类号
TS202.1
栏目名称
DOI
10.7506/spkx1002-6630-20250109-061
发布时间
2025-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
- 浏览0
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
