表面活性剂介导的膜透化对枯草芽孢杆菌工程菌产甲萘醌-7的影响
Effect of Surfactant-Mediated Membrane Permeabilization on Menaquinone-7 Production by Engineered Bacillus subtilis
摘要采用表面活性剂介导细胞膜渗透化提高工程菌株甲萘醌-7(menaquinone-7,MK-7)的产量,并探究其作用机制.以工程菌株BS168-ΔSinR作为起始菌株,通过对多种表面活性剂进行筛选和优化,进一步提高该菌株的MK-7产量.利用扫描电镜观察细胞的形态,流式细胞仪和荧光显微镜检测细胞膜的渗透性,RNA-seq分析影响MK-7产量相关的基因表达水平.结果显示,添加0.7%Brij-58可显著提高MK-7产量,使得MK-7总产量较对照菌株提高了71.95%,其中胞外MK-7产量提高了332.29%.扫描电镜、流式细胞仪和荧光显微镜的结果表明,Brij-58介导的膜透化与MK-7产量的提高有显著关联.RNA-seq分析表明,参与MK-7生物合成及抗氧化防御系统相关的基因表达水平普遍上调,而孢子形成相关的基因表达水平均下调.本研究结果为MK-7的工业化生产提供了理论依据,并揭示了表面活性剂介导的膜透化提高MK-7产量的作用机制.
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