载姜黄素菠菜外泌体样囊泡的制备及其缓解神经炎症损伤作用
Preparation of Curcumin-Loaded Spinacia oleracea L.-Derived Exosome-Like Nanovesicles and Their Role in Alleviating Neuroinflammatory Damage
摘要目的:探究载姜黄素(curcumin,Cur)菠菜外泌体样囊泡(Spinacia oleracea L.-derived exosome-like nanovesicles,SL-ELNs)对神经细胞炎症损伤的缓解作用.方法:采用高速离心和超滤法从菠菜中分离纯化SL-ELNs,对其结构和成分进行表征.以SL-ELNs壁材装载Cur,制备Cur@SL-ELNs,采用高效液相色谱仪分析Cur包封率,通过体外消化模拟实验评估Cur的释放率.测定在不同pH值条件下Cur@SL-ELNs的水合粒径、Zeta电位、孟加拉玫瑰红吸附能力及黏蛋白亲和力.通过激光共聚焦成像仪监测小鼠小胶质细胞(BV-2)对Cur@SL-ELNs的摄取情况,评估Cur@SL-ELNs对BV-2细胞增殖的影响.采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导BV-2细胞炎症损伤,采用酶联免疫试剂盒法对比Cur@SL-ELNs与Cur对细胞因子分泌水平的影响.结果:SL-ELNs为纳米级杯状囊泡,可实现Cur完全包封.Cur@SL-ELNs在口腔和胃酸中稳定,在肠液中囊泡破裂,缓慢释放Cur,释放率达(92.1±4.1)%.Cur@SL-ELNs具有良好的自适应表面特性,有利于其被BV-2细胞摄取.在质量浓度达200 ng/mL时,Cur@SL-ELNs表现出良好的生物相容性,可恢复LPS诱导的BV-2细胞损伤,促进其生长.与Cur相比,Cur@SL-ELNs(100 ng/mL)在抑制白介素-6(interleukin-6,IL-6)和干扰素-γ分泌的同时,能促进IL-10的分泌,从而降低LPS对BV-2细胞产生的炎症损伤.结论:Cur@SL-ELNs具有自适应表面特性,可稳态化递送Cur,发挥抗炎活性,缓解LPS诱导的炎症损伤,发挥神经保护作用.
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