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稳定同位素标记衍生化结合LC-MS/MS测定葱属食品中的甾体皂苷元

Stable Isotope Labeling Derivatization Combined with LC-MS/MS for the Determination of Steroidal Sapogenins in Allium Vegetables

摘要目的:为提高葱属食品中甾体皂苷元(如剑麻皂苷元和菝葜皂苷元)的检测灵敏度和准确度,该研究建立了一种基于稳定同位素标记衍生化结合液相色谱-串联质谱的分析方法.方法:采用D0/D5-吡啶和三氟甲磺酸酐(Tf2O)对甾体皂苷元的3-羟基进行电荷标记衍生化,利用D0和D5同位素衍生物峰面积比进行内标定量.结果:优化后的衍生化反应在室温下10 min即可完成,衍生化产物稳定性良好;方法学验证表明,其线性范围宽(0.5~200 ng/mL,R2>0.999 4),检出限显著降低至0.2 ng/mL(较未衍生化方法降低95%),精密度(日内相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)≤4.02%,日间RSD≤4.36%)和加标回收率(95.5%~104.2%)优异.将该方法应用于实际葱属样品分析,成功测定并揭示了大葱、小葱、洋葱和大蒜中剑麻皂苷元与菝葜皂苷元的含量分布特征.结论:该策略通过电荷标记增强电离效率和同位素内标补偿基质效应,为葱属食品中甾体皂苷元的高灵敏、高准确度定量提供了可靠方案,并可为其他低电离效率天然产物的分析提供参考.

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