氧化白藜芦醇和抗坏血酸协同抑制多酚氧化酶机制
Mechanism of Synergistic Inhibition of Oxyresveratrol and Ascorbic Acid on Polyphenol Oxidase
摘要为探究氧化白藜芦醇(oxyresveratrol,OXY)与抗坏血酸(ascorbic acid,AA)协同抑制多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)的机制,本研究通过抑制率测定、动力学分析、分子对接及结构表征等方法系统评价其协同效应.结果表明,OXY和AA协同处理能够显著抑制鲜切马铃薯丝的褐变和PPO活性,其中OXY与AA以2:1体积比复配时协同效果最佳,其PPO抑制率比单一OXY和AA处理分别提高9.08%和38.12%,铜离子螯合能力比单一OXY和AA处理提高41.07%和135.45%.动力学分析表明,协同处理属于混合型抑制,对游离PPO和对酶-底物复合物的抑制常数分别为2.46 μmol/L和3.27 μmol/L.分子对接结果表明,协同处理的OXY-AA-PPO复合物所形成氢键数量增加,且与单一处理相比,协同处理的结合能分别降低2.32、4.45 kcal/mol,其蛋白构象稳定性增强.荧光光谱和圆二色光谱分析也表明,OXY和AA以2:1体积比复配时发射荧光强度为原酶的71.93%,其β-折叠结构的相对含量分别比单一处理分别减少了20.2%、10.4%,证实协同作用通过破坏酶的三级结构和二级结构实现.本研究可为协同抑制技术在鲜切果蔬保鲜方面的应用提供参考.
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