基于UPLC-Q-TOF-MS和网络药理学分析蒲公英水提物的抗炎成分及其机制
Elucidating the Anti-inflammatory Components and Mechanisms of Water Extracts from Taraxacum mongolicum Based on UPLC-Q-TOF-MS and Network Pharmacology
摘要为系统分析蒲公英叶和根提取物的抗炎活性成分和作用机制,采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7建立体外细胞炎症模型,测定细胞上清液中一氧化氮(NO)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)的表达水平.同时采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight-mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS)技术对其水提物的化学成分进行鉴定,结合网络药理学预测潜在的抗炎活性成分及其作用靶点,并将潜在的活性成分与核心炎症靶点进行分子对接虚拟验证.结果显示,蒲公英叶、根水提物在0~600 μg/mL质量浓度范围内对RAW264.7细胞无显著细胞毒性,细胞存活率均在98.7%以上.叶、根水提物均可显著抑制LPS诱导的NO合成及IL-6、TNF-α分泌,且呈一定的浓度依赖性.UPLC-Q-TOF-MS技术从蒲公英叶和根水提物中共鉴定出56种化学成分,包括黄酮类17种、酚酸类15种、萜类9种、有机酸4种、儿茶素类2种、甾体类2种、苯丙素类2种、核苷类2种以及其他类3种.网络药理学预测发现叶和根水提物可能通过芫花素、甘草次酸、木犀草素、科罗索酸、异绿原酸C、咖啡酰酒石酸、菊苣酸、木犀草素-7-O-(6"-丙二酰葡萄糖苷)、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、绿原酸等成分作用于甘油醛-3-磷酸脱氢酶、AKT1、IL-1β、TNF、IL-6、TP53、表皮生长因子受体等核心靶点,调节神经活性配体-受体相互作用、肌萎缩侧索硬化疾病通路及环磷酸鸟苷-蛋白激酶G等信号通路而有效发挥抗炎作用,分子对接可视化验证显示,炎症核心靶点与关键有效成分之间具有良好的结合活性.蒲公英叶、根水提物具有显著的抗炎活性,其作用涉及多成分、多靶点、多通路的协同机制,该研究为蒲公英作为药食同源植物的抗炎功能开发提供了科学依据.
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