换一批动物双歧杆菌乳亚种M8胞外多糖的分离纯化和分子特征
Isolation and molecular characteristics of exopolysaccharides produced by Bifidobacterium animalis subsp. lactis M8
摘要动物双歧杆菌是一种高产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的益生菌,在食品工业中应用广泛.该研究以动物双歧杆菌亚种M8为研究对象,发酵提取EPS,分别选用乙醇分级沉淀(ethanol gradient precipitation,EGP)法和阴离子交换色谱(anion-exchange chromatography,AEC)法对其进行分离纯化,并通过化学成分和高效分子排阻色谱分析评价纯化效果.结果表明,EGP法分离得到的多糖级分,在糖纯度和分子质量分布均一性方面均未达到纯化要求;而AEC法可分离纯化得到高纯度的酸性杂多糖F0.2、蛋白聚糖F0.5,其工艺为:柱填料DE-AE-Sepharose Fast Flow,依次采用纯水、0.1、0.2、0.5 mol/L NaCl溶液洗脱,制备得到纯多糖级分F0.2和F0.5,样品总回收率达80.85％.分子结构特征分析表明,F0.2是由葡萄糖、半乳糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成的一种酸性杂多糖,重均分子质量(Mw)为21.4 kDa,在水溶液中呈刚性较强的松散线团结构;而F0.5是缀合有蛋白组分的蛋白聚糖,Mw为28.3 kDa,在水溶液中呈紧凑的柔性卷曲状结构.该研究确定的分离纯化方法具有高效、回收率高等特点,为动物双歧杆菌乳亚种M8产EPS的结构与功能研究及其在食品工业中的应用奠定科学依据.
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