换一批E49F对麦氏交替单胞菌木聚糖酶XynZT-2的活性分析
Effect of E49F on the activity of xylanase XynZT-2 from Alteromonas macleodii
摘要为了探究酶表面氨基酸残基对催化性能的影响,对麦氏交替单胞菌(Alteromonas macleodii)的木聚糖酶XynZT-2进行分子改造.基于计算机模拟,预测了潜在的有益突变体E49F,通过定点突变构建突变酶基因xynZT-2E49F,并将原酶与突变酶基因转化大肠杆菌BL21(DE3)异源表达.酶学性质分析发现,突变酶XynEF最适温度为70℃,相比原酶XynZT-2提高了 25 ℃,酶活力提高了 6.4倍.酶动力学分析发现,突变酶的kcat/Km值相比原酶提高了 10.1倍,突变酶的Km值明显下降,对底物的亲和力增强.通过酶与底物分子对接,揭示了底物在突变酶催化活性口袋内的结合构象以及酶活力提高的潜在原因.为GH43家族木聚糖酶的分子改造研究提供了基础.
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关键词
麦氏交替单胞菌木聚糖酶定点突变酶学性质分子对接Alteromonas macleodiixylanasesite-directed mutagenesisenzymatic propertiesmolecular docking
栏目名称
DOI
10.13995/j.cnki.11-1802/ts.034509
发布时间
2023-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
河南省科技厅科技攻关项目（212102210652）；
河南省科技厅科技攻关项目（222102110372）；
河南省高等学校重点科研项目（21A180024）；
河南省高等学校重点科研项目（22A180022）
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