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交叉引物等温扩增检测霍乱弧菌方法的建立

Detection of Vibrio cholera by Lsothermal Cross-priming Amplification

摘要建立食品中全血清型霍乱弧菌的交叉引物等温扩增检测方法.针对霍乱弧菌设计特异性引物及探针,建立交叉引物等温扩增法,利用免疫金标试纸条对结果进行检测.用57株霍乱弧菌及相近株细菌进行特异性试验;通过定量DNA、纯菌液计数、样品中添菌检测及与环介导等温扩增方法进行灵敏度验证及比较工作.结果表明,建立方法具有较好特异性;DNA检测灵敏度为79.28 fg/test,增菌液检测灵敏度为4.2×102 CFU/mL,当每25克样品中有5.6 CFU菌时经增菌步骤后即可检出.建立的交叉引物恒温检测方法可作为食品中霍乱弧菌快速初筛检测方法使用,较环介导等温扩增方法灵敏且易于操作.

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