高效凝胶色谱法同时测定普鲁兰多糖生物合成过程中分子量和含量
Simultaneous Determination of Molecular Weights and Contents of Pullulan during Fermentation Process of Aureobasidium pullulans by High Gel Permeation Chromatography
摘要为了建立出芽短梗霉发酵过程中同时测定普鲁兰多糖分子量和含量的高效分子排阻色谱分析方法.采用保护柱(UltrahyfrogelTM6×40 mm)和凝胶柱(UltrahydrogelTMLinear 7.8×300 mm),流动相0.1 mol/L NaNO3,流速0.5 mL/min,柱温30℃,示差折光检测器(Waters 2424),以普鲁兰多糖分子量标准物进行分子量和含量标准曲线测定,利用建立的方法和标准曲线测定出芽短梗霉CGMCC No.11602发酵过程中普鲁兰多糖的分子量大小和含量.结果表明:普鲁兰多糖重均分子量(Molecular weight,Mw)在9.6 kDa~2350 kDa范围内,线性关系良好(R2=0.99),含量范围为0.2 g/L~1.0 g/L时,线性关系良好(R2=0.99),相比于传统的方法,利用发酵液同时测定普鲁兰多糖含量和分子量与传统测定方法结果无显著性差异(p>0.05).通过新的检测方法,不仅能够实现普鲁兰多糖发酵过程中含量与分子量的实时检测,也为可控性生产不同分子量普鲁兰多糖提供技术手段.
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