产芽孢菌调控五羟色胺促进胃肠动力的机制研究

Study on the Mechanism of Spore-forming Microbes Promoting Gastrointestinal Motility through Regulating Serotonin Content

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摘要为探究产芽孢菌对胃肠运动的调节作用及其潜在机制,利用氯仿提取法在体外提取健康志愿者粪便中的产芽孢菌菌液,并通过聚合酶链式反应验证产芽孢菌菌液的提取效果.运用抗生素鸡尾酒法建立伪无菌(pseudo-germfree,PGF)小鼠模型,并用粪便菌悬液涂板实验及肠杆菌基因间保守重复序列-聚合酶链式反应(enterobacterial repetitive intergenic consensus sequences-polymerase chain reaction,ERIC-PCR)进行模型评价.PGF小鼠造模第11天,小鼠粪便悬液涂板无明显菌落且ERIC-PCR条带显著减少,表明实验造模成功.成模后,将小鼠随机分为模型组和产芽孢菌定殖组,进行两周的产芽孢菌定殖,采用荧光定量核酸扩增检测方法检测产芽孢菌定殖情况.通过小肠推进率和胃残留率实验测定胃肠动力,并收集小鼠结肠和血浆,检测其中五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)的含量以及结肠中色氨酸羟化酶1(tryptophan hydroxylase 1,TPH1)的表达水平.实验结果表明,产芽孢菌定殖后,小鼠胃残留率显著下降(P<0.05),小肠推进率显著升高(P<0.01),粪便中瘤胃球菌属、扭链瘤胃球菌属、多尔氏菌属含量显著上升,结肠和血浆中5-HT含量明显提高,但是结肠中TPH1表达明显下调.表明产芽孢菌可通过提高肠道和血浆中5-HT的含量水平以促进胃肠运动.