脱脂榛子粉标准样品的制备及其过敏原检测方法验证

Preparation of Reference Material of Degreased Hazelnut Powder and Verification of Methods for Detection of Allergens

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摘要为解决用于食品过敏原检测的榛子标准样品缺乏的问题,将精选的榛子果仁经粉碎、正己烷脱脂、过筛处理制成呈松散状的脱脂细粉.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-timepolymerase chain reaction,qPCR)法和酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法进行验证,并比较脱脂前后榛子特性值的变化,进行均匀性、稳定性检验及定值分析.制备好的符合条件的脱脂榛子粉标准样品,用于qPCR和ELISA检出限的验证.结果表明,未经脱脂处理的榛子粉样品Oleosin基因Ct值为 26.22±0.47,脱脂处理后的Ct值为 25.80±0.31;经方差分析,在 95%置信概率下,两种方法测定值计算得到的F比分别为 2.17 和 2.10,均小于F临界值F0.05(14,15)=2.42,表现出良好的均匀性;两种方法测定值的|b1|分别为 0.011 67 和 0.00024,均小于t(0.95,n-2)×s(b1),统计量p值分别为 0.08和 0.054(p＞0.05);群组间统计量p值分别为 0.14 和 0.27(p＞0.05),稳定性良好;经验证,ELISA方法相比qPCR具有更好的检测灵敏度,可检测到食品中 0.0001%含量的榛子残留物.