换一批
换一批重组磷脂酶D Sp-TLI146的发掘及其在DHA磷脂酰单甘油酯的合成中的应用
Discovery of Recombinant Phospholipase D Sp-TLI146 and Its Application in Synthesis of DHA Phosphatidyl Monoglycerides
摘要从链霉菌中克隆一个磷脂酶 D(phospholipase D,PLD)的编码基因 Sp-TLI146,并将其在大肠杆菌 BL21(DE3)中进行异源表达.利用镍离子亲和层析后得到纯酶并对其酶学性质进行研究.酶学性质研究显示,重组PLD的最适温度为 65℃,在 50～65℃时,其相对酶活力仍高于 60%;最适pH值为 6.0 的磷酸-磷酸钠缓冲液,在pH4.0～8.0 的相对酶活力高于 70%.以鱿鱼卵为来源,使用有机溶剂浸提法提取DHA磷脂酰胆碱(docosahexaenoic acid phosphatidylcholine,DHAPC)并对其进行纯化,在重组PLD Sp-TLI146 的催化作用下,与不同的甘油酯反应合成DHA磷脂酰单甘油酯,在最适条件下,反应 4h转化率可达 90%以上.
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关键词
磷脂酶D异源表达酶学性质DHA磷脂酰单甘油酯转酯反应phospholipase Dheterologous expressionenzymatic propertiesDHA phosphatidyl monoglyc-eridetransesterification reaction
栏目名称
生物工程
DOI
10.12161/j.issn.1005-6521.2024.21.024
发布时间
2024-11-20
基金项目
国家自然科学基金
国家重点研发计划
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