藏羊血多肽制备工艺优化及其抗氧化活性

Optimization of the Preparation Process of Tibetan Sheep Blood Peptide and Its Antioxidant Activity

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摘要以藏羊血液为原料,通过优化酶解条件,制备藏羊血多肽并分析其抗氧化活性.使用风味蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶分别对藏羊血液进行水解,并以水解度为指标筛选适宜蛋白酶,在此基础上,研究酶解时间、加酶量、酶解温度、料液比和pH值对水解度的影响;采用响应面分析法对酶解参数进行优化;使用中高压液相色谱对血肽进行初步分离纯化和制备,以DPPH自由基和ABTS+自由基清除率试验探究藏羊血液多肽的体外抗氧化活性.结果表明,藏羊血多肽最佳水解酶为风味蛋白酶,最佳酶解条件为水解时间 5h、酶解温度 56℃、料液比 1∶7(mg/mL)、加酶量 1 050.00 U/g.在此条件下,水解度可达(54.90±0.32)%;体外抗氧化试验结果显示,藏羊血多肽粗品在高浓度时对DPPH自由基和ABTS+自由基的清除率分别可达阳性对照VC的 77%和87%,IC50 分别为(17.97±1.07)mg/mL和(14.36±0.63)mg/mL,使用SpHerical C18 色谱柱将藏羊血肽分离为 10 个组分,分离后的组分Fr3 显示出较好的抗氧化活性,超过阳性对照.