酶法破壁提取松花粉功能成分的工艺优化及抗氧化活性分析
Process Optimization for Extraction of Functional Components in Pine Pollen via Enzymatic Wall Disruption and Analysis of Antioxidant Activities
摘要为探索酶解、超声、碱处理辅助破壁和提取松花粉中活性成分的协同作用,采用扫描电镜对松花粉微观结构进行分析,并使用高效液相色谱法分析酚类物质的组成和含量变化.结果表明,经12.5%碱性蛋白酶酶解60 min后,松花粉可溶出部分的总酚含量、总黄酮含量和ABTS阳离子自由基清除能力均达到最高值,分别为(5.97±0.09)mg GAE/g DW 松花粉、(1.65±0.04)mg RE/g DW 松花粉、(95.12±1.84)μmol TE/g DW 松花粉.将酶解辅以超声协同0.3 mol/L NaOH处理后,总酚、总黄酮、ABTS阳离子自由基清除能力及铁离子还原能力相比未处理花粉分别提高107%、113%、73%和81%.扫描电镜结果显示,碱处理酶解后花粉细胞壁破碎程度明显增加,花粉内含物质从裂口处向外溢出,与理化指标趋势一致.最佳工艺条件为0.3 mol/L NaOH超声-碱处理60 min,调节pH值至7,12.5%的碱性蛋白酶于50 ℃下酶解60 min.综上,超声碱处理可辅助酶解实现松花粉的高效破壁,同时小肽、多酚、黄酮等营养成分也进一步溶出,促进松花粉的高值化利用.
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