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基于酵母双杂交的微囊藻毒素检测系统初探

DETECTION OF MICROCYSTINS BASED ON YEAST TWO-HYBRID SYSTEM

摘要微囊藻毒素是由淡水微囊藻产生的次生代谢物,结构为环状七肽,分子量约1000Da,对生物机体具有多种毒理作用,是一类较强的肿瘤促进剂,目前没有比较简单便宜的藻毒素检测方法,本文探索建立利用酵母双杂交系统进行藻毒素检测的方法.前期实验已用噬菌体表面展示肽库技术从随机12和7肽库中筛选获得若干与藻毒素有相互作用的多肽.本文分别挑选其中亲和力较高的3个多肽,构建到酵母双杂交系统中,将不同的肽段分别融合在含有Active Domain和Binding Domain的表达载体中,共转化酵母菌株AH109,然后测定β-半乳糖苷酶活性来反映下游报告基因半乳糖苷酶的表达情况,从而通过反映培养基里面是否含有藻毒素,进而利用此方法来比较方便地检测藻毒素.

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DOI 10.3321/j.issn:1000-3207.2008.02.010
发布时间 2008-07-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家自然科学基金(30425009)
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水生生物学报

水生生物学报

2008年32卷2期

201-206页

ISTICPKUCSCDCABP

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