球等鞭金藻中Δ5去饱和酶基因的克隆与功能鉴定
ISOLATION AND FUNCTIONAL ANALYSIS OF A Δ5 DESATURASE GENE FROM ISOCHRYSIS GALBANA
摘要球等鞭金藻(Isochrysis galbana)是一类单细胞海洋微藻,富含二十二碳六烯酸(DHA,22:6Δ4,7,10,13,16,19).我们利用RACE 的方法从球等鞭金藻cDNA 文库中同源克隆到一个大小为1329 bp 的cDNA 片段,编码442个氨基酸的多肽,分子量约49.9 kD.生物信息学分析表明,其编码产物N 端具有细胞色素b5 结构域,以及与电子传递有关的三个富含组氨酸的结构域,与Pavlova salina Δ5 去饱和酶同源性最高,达56%,故将该基因命名为IgD5.酿酒酵母功能鉴定实验表明,其编码的蛋白质具有Δ5 去饱和酶活性,能够将二高-γ-亚麻酸(DGLA,20:3Δ8,11,14)转化成花生四烯酸(AA,20:4Δ5,8,11,14),转化效率平均为34.6%,最高可达40.3%.
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