斑节对虾(非洲群体)肠道中哈维氏弧菌拮抗菌的筛选、鉴定及生理特性分析

SCREENING, IDENTIFICATION AND PHYSIOLOGICAL CHARACTERISTICS OF INTESTINAL BACTERIA AGAINST VIBRIO HARVEYI FROM PENAEUS MONODON

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摘要基于斑节对虾(非洲群体)(Penaeus monodon)肠道菌的生理生化特性,为解决斑节对虾急性肝胰腺坏死综合征(AHPND)提供新思路,文章分离纯化健康斑节对虾肠道中的优势菌株;以致病性哈维氏弧菌为指示菌,用牛津杯法从纯化菌株中筛选拮抗菌;通过生理生化特征、Biolog系统鉴定及16S rDNA技术综合方法对菌株进行鉴定;通过药敏实验,评价拮抗菌株的安全性;绘制高敏拮抗菌株的生长曲线,得出其生长特性;通过测定其产酶活性,形成对其益生机制的初步推断.从斑节对虾肠道中共分离得到14株的优势土著菌,分别标记为P.m-1、P.m-2······P.m-14,经过拮抗实验得到了3株拮抗菌(P.m-1、P.m-9和P.m-13).经鉴定P.m-1、P.m-9和P.m-13分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)和溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus).药敏实验结果表明,3株拮抗菌均不属于耐药菌,P.m-1对药物高度敏感.生长特征实验表明:P.m-1在2h进入对数期,10h达到生长高峰,菌体密度可达1.14×109 cfu/mL,表现出了强劲的生命力.经过蛋白酶活性测定,P.m-1具有较强的产酶能力.优势菌P.m-1具有成为益生菌的潜力,后续将作为功能性饲料添加剂或水质调节剂进行应用,为AHPND进行生物防治提供新思路.