换一批
换一批缺刻缘绿藻磷脂酶A2(PLA2)的基因特征与功能
CHARACTERIZATION AND FUNCTIONAL IDENTIFICATION OF A PHOSPHOLIPASE A2 GENE FROM THE ARACHIDONIC ACID-RICH GREEN MICROALGA MYRMECIA INCISA REISIGL
摘要为进一步鉴定磷脂酶A2(PLA2)在缺刻缘绿藻(Myrmecia incisa)油脂合成过程中的具体功能,研究利用RACE技术从缺刻缘绿藻H4301中克隆到pla2基因(Mipla2)的cDNA序列全长,共1082 bp.该全长包含180 bp的5′-非翻译区(UTR),464 bp的3′-UTR和438 bp的开放阅读框(ORF),编码1个由145个氨基酸组成的蛋白.其基因全长为1594 bp,含有3个内含子和4个外显子.多序列比对结果显示,MiPLA2具有保守的Ca2+结合基序和催化活性基序.系统演化分析结果显示MiPLA2属于植物sPLA2-XIA家族.利用同源重组技术构建了pET32a-Mipla2原核表达载体,经过诱导和纯化,得到了分子量大小为31.36 kD的重组MiPLA2蛋白.体外酶促反应的产物经薄层层析分析显示,重组表达的MiPLA2具有催化磷脂酰胆碱(PC)水解成溶血磷脂酰胆碱(LPC)的功能.研究结果有助于解析花生四烯酸被优先用于三酰甘油(TAG)合成的途径与机理,为通过pla2基因的遗传改造提高该藻油脂产率的应用研究奠定了基础.
更多相关知识
- 浏览27
- 被引0
- 下载1
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
