乌鳢白细胞衍生趋化因子LECT2互作蛋白的筛选与鉴定
SCREENING AND IDENTIFICATION OF INTERACTING PROTEINS OF LECT2 IN CHANNA ARGUS
摘要为了解乌鳢(Channa argus)白细胞衍生趋化因子2(CaLECT2)在抗菌免疫过程中所调控的配体蛋白,克隆获得CaLECT2基因,并对其表达特征进行了分析.利用体内注射试验分析了CaLECT2对乌鳢机体的免疫增强作用.利用His-pull down联合质谱、Co-IP分析了CaLECT2的互作蛋白.结果显示,在感染鰤诺卡氏菌的乌鳢脾脏、肾脏和肝脏中,CaLECT2 mRNA的表达量显著上调.利用原核表达系统表达纯化获得了CaLECT2重组蛋白.通过Western Blot证明rCaLECT2抗血清可以特异性识别CaLECT2重组蛋白.向乌鳢体内注射CaLECT2蛋白可以显著提高脾脏内巨噬细胞数量.Pull down联合质谱鉴定得到Fetuin-like protein、Sero-transferrin和CD209等253个潜在的互作蛋白.Co-IP结果进一步确认了CaLECT2与CD209存在互作关系.研究为深入探讨CaLECT2所调控的配体蛋白功能奠定了前期基础.
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