鱼源性嗜酸乳杆菌AC对斑马鱼幼鱼氨氮抗性的影响
FISH-DERIVED LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS AC ON AMMONIA NITRO-GEN RESISTANCE OF JUVENILE ZEBRAFISH(DANIO RERIO)
摘要为探究鱼源性嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)AC对氨氮胁迫下斑马鱼幼鱼的保护作用.实验将180尾平均体重为(83.02±4.08)mg的6周龄AB品系斑马鱼(Danio rerio)幼鱼随机均分为4组:AC0组(0 CFU/mL 嗜酸乳杆菌AC)、AC5组(105 CFU/mL 嗜酸乳杆菌AC)、AC6组(106 CFU/mL 嗜酸乳杆菌AC)和AC7组(107 CFU/mL 嗜酸乳杆菌AC).将嗜酸乳杆菌AC按预设浓度加入至斑马鱼幼鱼养殖水体中,进行为期32d的饲养.随后将各组幼鱼于35.80 mg/L总氨氮的环境中暴露48h,检测鳃抗氧化参数、鳃组织病理变化及鳃与脑组织相关基因表达.结果表明,相较于AC0组,AC7组鳃组织Na+/K+-ATP酶和总超氧化物歧化酶(SOD)的活性均显著升高(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05).病理学分析显示,各组鳃组织均不同程度受损,AC0组损伤最重,表现为鳃小片卷曲和基部泌氯细胞及柱状上皮细胞明显水肿、变性和坏死.相较于AC0组,补充嗜酸乳杆菌AC后的鳃小片损伤较为轻微;鳃和脑组织基因表达分析显示,补充嗜酸乳杆菌AC的鳃和脑的炎症细胞因子基因的表达量呈降低趋势,且AC7组脑组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达量显著低于AC0组(P<0.05);相较于AC0和AC5组,AC7组鳃组织的谷氨酸脱氢酶(GDH)和SOD基因的表达量显著上调(P<0.05),鳃和脑中谷氨酰胺合成酶(GS)基因表达显著上调(P<0.05);另外,相较于其他组,AC7组鳃组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)基因表达显著上调(P<0.05),且补充嗜酸乳杆菌AC的鳃和脑组织中半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶8(caspase 8)基因的表达均出现不同程度的下调.综上,嗜酸乳杆菌AC通过调控抗氧化及氨同化酶基因的表达,增强抗氧化酶活性并减轻鳃氧化应激损伤,提高斑马鱼幼鱼对氨氮胁迫的耐受性.
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