重组大口黑鲈IFN-γ的生物学活性及其抗LMBV感染的保护机制
BIOLOGICAL ACTIVITY OF RECOMBINANT IFN-γ FROM LARGEMOUTH BASS(MICROPTERUS SALMOIDES)AND ITS PROTECTIVE MECHANISM AGAINST LMBV INFECTION
摘要为了探讨II型干扰素IFN-γ(interferon-γ)在大口黑鲈(Micropterus salmoides)抗大口黑鲈蛙虹彩病毒(Largemouth Bass Ranavirus,LMBV)感染中的作用及机制,本研究利用pCold-TF/Rosetta(DE3)表达体系原核表达并纯化获得重组蛋白rMsIFN-γ,随后在大口黑鲈脊髓细胞系(Micropterus salmoides spinal cord cell line,MSSC)及鱼体水平评估其活性与抗LMBV效果.结果显示,rMsIFN-γ分子量约21 kD.体外可显著上调MSSC细胞Mx、ISG15、SOCS1和IRF9的表达,并在预防性与治疗性处理条件下均表现出一定抗LMBV作用.体内方面,rMsIFN-γ可诱导脾脏与头肾中Mx、ISG15、SOCS1、IRF9及促炎因子IL-1β、TNF-α和趋化因子IL-8表达.在体内治疗性实验中,感染早期rMsIFN-γ处理组Mx与ISG15表达水平低于病毒感染对照组,但IL-1β与IL-8显著上调,LMBV即刻早期蛋白ICP46表达下降;随后组织病毒载量降低并延缓感染鱼的死亡进程.综上,rMsIFN-γ在体外与体内均具有一定抗LMBV作用,其保护效应可能与典型干扰素诱导的ISGs通路及体内炎症/趋化反应协同参与有关.本研究揭示了IFN-γ在大口黑鲈抗LMBV中的潜在应用价值,为其免疫防控提供了新思路.
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