换一批免疫荧光技术中不同固定方式及渗透时间对人红细胞带3蛋白染色效果的影响
Effect of different fixation methods and penetration time on the staining effect of human erythrocyte band 3 protein in immunofluorescence technique
摘要目的:探讨免疫荧光技术中不同固定方式及渗透时间对人红细胞带3蛋白染色效果的影响.方法:采集志愿者外周血红细胞,细胞涂片或离心后,使用不同固定剂(甲醇、2%多聚甲醛-0.005%戊二醛固定液)固定,固定后经0.1%Triton X-100渗透1～5 min,采用免疫荧光的方法观察红细胞形态及带3蛋白的定位.结果:红细胞带3蛋白表达于细胞膜.涂片法固定中,红细胞涂片经甲醇固定虽会引起细胞一定程度的收缩,但固定效果较好且细胞损失少;渗透对其形态及带3蛋白定位观察影响不大;而使用2%多聚甲醛-0.005%戊二醛作为固定液固定涂片红细胞后,细胞脱片严重.细胞悬液固定法中,红细胞悬液经2%多聚甲醛-0.005%戊二醛固定,细胞在后续各步离心清洗过程中溶血,损失严重.细胞涂片固定后0.1%Triton X-100渗透1～3 min,观察细胞形态及带3蛋白定位最佳.渗透5 min,红细胞形态改变,胞浆出现荧光染色.结论:外周血红细胞的免疫荧光技术中,采用细胞涂片及甲醇固定1 min,0.1%Triton X-100作用1～3 min可以更好地观察红细胞膜上的带3蛋白.
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关键词
免疫荧光技术红细胞带3蛋白固定剂渗透时间immunofluorescence techniqueerythrocytesband 3 proteinfixativepenetration time
分类号
R392.1（医学免疫学）
栏目名称
DOI
10.13401/j.cnki.jsumc.2025.01.007
发布时间
2025-04-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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