双钩巢粉虱的种特异性SS-COⅠ检测技术

Species-specific COⅠ primers to assist the molecular identification of the invasive whitefly, Paraleyrodes pseudonaranjae

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摘要[背景]双钩巢粉虱是近年在我国南方新发现的一种入侵害虫,其寄主范围广,危害严重,进一步扩散蔓延趋势明显.[方法]针对粉虱类害虫体型微小、形态相似、难以准确快速识别的问题,以双钩巢粉虱为靶标,以我国常见的其他8种/隐种粉虱为参照,采用基于mtDNA COⅠ基因的种特异性SS-COⅠ方法,研究其快速分子检测技术.利用COⅠ通用型引物LCO-1490/HCO-2198获得双钩巢粉虱及其他常见粉虱的COⅠ序列,根据测序结果设计特异性SS-COⅠ引物1对(PPZYF1/PPZYR1),其扩增片段大小为233 bp.[结果]种特异性检验结果显示,该引物只对双钩巢粉虱的COⅠ基因具有扩增能力,对其他种/隐种粉虱,包括烟粉虱的不同隐种(MEAM1隐种、MED隐种、AsiaⅡ3隐种和AsiaⅡ1隐种)以及温室粉虱、柑橘粉虱、黑刺粉虱、螺旋粉虱等不具有扩增效果.该引物不仅对不同性别的成虫具有良好的扩增能力,对1～4龄若虫和单粒卵亦具有同样的扩增效能,其最低检测阈值为1/40960头雌性成虫.[结论与意义]本检测技术对口岸检疫以及观赏植物、果树及其种苗调运中的害虫检测、监测意义重大.

作者张桂芬 ^[1] 郭建洋 ^[1] 王瑞 ^[1] 杨婷 ^[2] 李小凤 ^[2] 郭建英 ^[1] 曹凤勤 ^[3] 张金良 ^[4] 万方浩 ^[1] 学术成果认领

作者单位中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193;农业部外来入侵生物预防与控制研究中心,北京100081 ^[1] 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193 ^[2] 海南大学环境与植物保护学院,海南海口,570228 ^[3] 北京市植物保护站,北京,100029 ^[4]

关键词双钩巢粉虱种特异性SS-COⅠ引物快速鉴定分子检测

主题词半翅目(Hemiptera)种特异性(Species Specificity)方法(Methods)基因(Genes)才能(Aptitude)

栏目名称 生物入侵

DOI 10.3969/j.issn.2095-1787.2013.03.002

发布时间 2013-12-31

基金项目

国家“973”计划项目 公益性行业(农业)科研专项