换一批小菜蛾UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶基因的克隆、表达及功能研究
Molecular cloning,expression profiling,and functional analysis of a UDP-N-acetylglucosamine pyrophosphorylases gene from the Plutella xylostella(L.)
摘要[目的]克隆小菜蛾几丁质合成酶基因PxUAP并阐明其功能.[方法]基于小菜蛾基因组信息,利用RT-PCR克隆小菜蛾PxUAP基因的cDNA序列,并应用荧光定量PCR和RNA干扰技术分析该基因的表达模式及功能.[结果]PxUAP(GenBank登录号:OR659549)开放阅读框长度为1467 bp,预测编码488个氨基酸,蛋白分子质量为 54.985 ku,理论等电点为 6.12;与金凤蝶UAP(KPJ20218.1)同源蛋白亲缘关系较近,氨基酸同源性为 80.33％.发育表达谱结果表明,PxUAP在小菜蛾各个发育阶段均有表达,在雄成虫期的表达量最高;组织表达谱结果表明,PxUAP在雌成虫足和翅膀的表达量最高.RNAi结果表明,与注射ds GFP对照组相比,注射ds PxUAP显著降低了靶标基因和几丁质合成酶PxCHSA基因的表达量,且PxCHSB基因在24 和 48h的表达量也显著下降;注射ds PxUAP的小菜蛾大部分无法化蛹,蛹壳出现皱缩等畸形现象,并在注射后 168 h全部死亡.[结论]PxUAP是小菜蛾几丁质合成酶通路中的关键调控基因,对小菜蛾生长发育起至关重要的作用.
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关键词
小菜蛾RNA干扰几丁质UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶表达谱Plutella xylostellaRNA interferencechitinUDP-N-acetylglucosamine pyrophosphorylaseexpression profiling
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.2095-1787.2024.04.013
发布时间
2024-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（32072425）
福建省自然科学基金项目（2022J01457）
福建省农业科学院科技项目（GJYS202205）
福建省农业科学院科技项目（XTCXGC2021011）
福建省农业科学院科技项目（XTCXGC2021017）
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