换一批基于TaqMan-MGB探针的小麦叶疫病菌快速检测方法
A TaqMan-MGB probe-based real-time fluorescent PCR method for rapid detection of Alternaria triticina
摘要[目的]小麦叶疫病菌为我国进境检疫性有害生物,建立特异性的实时荧光PCR检测方法,可实现对其快速、灵敏、准确的检测.[方法]依据小麦叶疫病菌及其近似种翻译延长因子(EF)序列差异,设计合成特异性引物与MGB探针,并优化实时荧光PCR反应条件,优化后引物终浓度为0.7 μmol·L-1,探针终浓度为0.9 μmol·L-1.通过特异性试验、灵敏度试验及模拟样品检测验证该方法的可行性.[结果]特异性试验显示,该方法可特异性检出小麦叶疫病菌;灵敏度试验表明,在10 μL反应体系中,最低检测限量为总DNA含量 20 pg;模拟样品检测表明,此方法适用于疑似携带小麦叶疫病菌样品的检测.整个反应过程约1h,且检测全程闭管,无需PCR后续处理.[结论]本研究建立的实时荧光PCR检测方法快速、灵敏、准确,为小麦叶疫病菌的早期快速检测提供了重要技术参考,对防范该检疫性真菌的传入与扩散具有重要意义.
更多相关知识
关键词
小麦叶疫病菌实时荧光PCRTaqMan-MGB探针检测Alternaria triticinareal-time fluorescent PCRTaq Man-MGB probedetection
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.2095-1787.20250062
发布时间
2026-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点研发计划（2022YFF0608804）
国家自然科学基金（32322001）
海关总署科研项目（2022HK011）
宁波市社会公益科研项目（2022S010）
宁波中盛产品检测有限公司项目（2023ZS004）
- 浏览1
- 被引0
- 下载2
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
